目的 以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞为实验对象,在不同条件下进行原代培养,以探讨适合草鱼肝细胞生长的最佳条件及培养方法,用于饲料营养与非营养物质对草鱼肝细胞代谢、损伤作用机制的研究.方法 采用温胰蛋白酶消化法和红细胞裂解液分离、纯化肝细胞,MTT法测定细胞增殖率,并测定不同时期培养液上清液中LDH、Alb和BUN的含量,分析肝细胞生长状况.结果 采用0.25％浓度的温胰蛋白酶消化法,消化20min,分步收集肝细胞,经台盼蓝染色检测和血球计数板计数,活细胞数≥99％.结论 在含10％胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199培养基中,以接种浓度1.7×106cell/mL左右为宜,置于27℃、4.5％ CO2浓度的恒温培养箱中,可成功培养草鱼原代肝细胞.
作者：秦洁；叶元土；冷向军；蔡春芳；宋亮；许凡；张宝彤；萧培珍；张波；王丽宏
来源：中国实验动物学报 2012 年 20卷 3期
