目的 建立人BAFF转基因斑马鱼模型,探讨其在自身免疫性疾病发病中的作用.方法 RT-PCR法由人淋巴瘤细胞克隆了人BAFF基因全长855 bp蛋白编码区域,构建表达人BAFF重组质粒Tol2-hBAFF,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达.重组载体经显微注射斑马鱼受精卵后,GFP荧光跟踪并筛选阳性鱼.qPCR法检测早期免疫相关基因表达情况.结果 人BAFF-GFP融合蛋白可成功表达,利用Tol2-hBAFF重组质粒显微注射斑马鱼受精卵可获得表达人BAFF的转基因斑马鱼,且表达人BAFF斑马鱼dpf胚胎中TCRAC明显高表达,而Ikaros则表达量显著降低,表明在斑马鱼胚胎中表达人BAFF蛋白会造成早期淋巴系统中基因的过早表达.结论 建立的表达人BAFF的转基因斑马鱼,可为系统性红斑狼疮等与BAFF功能亢进密切相关的自身免疫性疾病的治疗,及相关机制研究提供一种具有诸多优点的新型工具.
作者：张力；周昕；谢英；刘超；徐增年；刘树锋
来源：中国实验动物学报 2013 年 21卷 5期
