目的 建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法.方法 选择已发表的BVDV 1型和BVDV 2型包含5' UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDV RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行方法学评价.同时用建立的RT-PCR方法检测了小牛血清、小牛血清去蛋白提取液、脾多肽注射液等41批次牛源性样本和64份牛血浆样本.牛源样本和64份牛临床样本.结果 建立的BVDV RT-PCR检测方法与牛副流感病毒III型(BPIV3)、猪瘟病毒(CSFV)、乙型脑炎病毒(JEV)均无交叉反应;检测BVDV 1型和BVDV 2型DNA模板最低浓度分别为每微升8.87 × 102拷贝和6.31 × 102拷贝, BVDV 1型和2型cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带.应用建立的BVDV RT-PCR方法检测41批次牛源样本和64份牛血浆样本,核酸阳性率分别为14.6
作者：王吉；付瑞；李晓波；王淑菁；王莎莎；李威；秦骁；巩薇；岳秉飞；贺争鸣
来源：中国比较医学杂志 2017 年 27卷 11期
