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目的 在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考.方法 以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培养.采用台盼蓝染色计算细胞活力,流式细胞检测技术计算纯度,倒置显微镜观察细胞形态.结果 获得较高纯度和活力的肝细胞,具备肝细胞的典型形态特征.结论 通过逆向灌注,降低了灌注的难度,同时获得较高纯度、较高活力的肝细胞,经多次实验证明该方法确实是一种易操作、高效适用的肝细胞提取方法.

作者:范仕郡;刘鑫;杨东;祝元锋;鲁永玲;郑江

来源:中国比较医学杂志 2017 年 27卷 11期

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作者:
范仕郡;刘鑫;杨东;祝元锋;鲁永玲;郑江
来源:
中国比较医学杂志 2017 年 27卷 11期
标签:
C57BL/6J小鼠 肝细胞 逆向灌注 活力 纯度 C57BL/6J mice Hepatocytes Reversed perfusion Viability Purity
目的 在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考.方法 以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培养.采用台盼蓝染色计算细胞活力,流式细胞检测技术计算纯度,倒置显微镜观察细胞形态.结果 获得较高纯度和活力的肝细胞,具备肝细胞的典型形态特征.结论 通过逆向灌注,降低了灌注的难度,同时获得较高纯度、较高活力的肝细胞,经多次实验证明该方法确实是一种易操作、高效适用的肝细胞提取方法.