为建立一种检测布鲁菌抗体的间接ELISA检测方法,本研究对Irr蛋白进行生物信息学分析、原核表达,用纯化的重组蛋白Irr作为包被抗原,建立了一种检测布鲁菌抗体的间接ELISA方法.结果显示,重组蛋白Irr包被量为0.25 μg,5％脱脂奶粉封闭2 h,一抗稀释浓度1∶500孵育2h,二抗稀释浓度1∶5000孵育2h,显色15 min时建立的间接ELISA方法条件最优,该方法的OD450临界值为0.55,与凝集实验的符合率达到96.7％,同时具有较好的特异性和重复性.以上结果表明,本研究基于Irr蛋白建立了操作简单、特异性高、重复性好的血清学间接ELISA检测方法,为布鲁菌病的诊断和流行病学调查提供了技术支持.
作者：孙天浩；张倩；曹旭东；李楠；程科建；张江伟；王震；陈创夫
来源：中国动物传染病学报 2023 年 31卷 4期
