目的 基因克隆、表达、纯化结核分枝杆菌38 ku蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值.方法 2003年2月至2004年3月在中国药品生物制品检定所菌苗室以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应(PCR)方法对38 ku蛋白基因进行扩增,以PET-30a(+)为载体构建重组质粒,在大肠埃希菌中表达38 ku蛋白,通过金属离子螯合亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析该重组蛋白的抗原性.结果 构建了具有正确基因序列的38 ku蛋白重组质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,经过一步金属离子螯合亲和层析后得到纯度为92.7
作者:周丽蓉;徐敬华;罗永艾;王国治
来源:中国实用内科杂志 2007 年 27卷 24期