为了探讨实时定量RT-PCR技术用于筛选转基因细胞株的可行性,以转染RbAp46基因的细胞株为研究对象,利用优化的SYBR Green I染料实时定量PCR技术检测RbAp46基因的的表达水平,并与半定量PCR及Western blot检测结果相比较.结果表明:K562/RbA46中RbAp46N为2064.42±253.47,KA562/CMV中RbAp46N为860.94±291.07;单克隆SHG44/RbAp46的细胞株中RbAp46N为234.46±31.08,多克隆SHG44/RbAp46的细胞株RbAp46N为18.17±5.14,SHG44/CMV为1.46±0.54.与半定量RT-PCR及Western blot检测结果比较,三者之间具有非常好的一致性.结论:实时定量RT-PCR技术可以用于筛选转基因细胞株,与半定量RT-PCR及Western blot检测方法比较,具有简便、快捷、重复性好、灵敏度高且不需要后期处理等优点.
作者：胡绍燕；陈子兴；赵晔；顾伟英；岑建农；钱军
来源：中国实验血液学杂志 2005 年 13卷 6期
