本研究通过检测经程控降温液氮保存前后的富集造血干/祖细胞的外周血单个核细胞(PBMNC)的活性氧(ROS)水平及造血干/祖细胞归巢分子的表达,分析二者之间的相关性.以冻存PBMNC为实验组,以新分离PBMNC为对照组,通过台盼蓝染色方法检测2组细胞的存活率；通过流式细胞分析法检测2组细胞ROS水平；通过流式细胞分析法检测造血干/祖细胞表面抗原CD34、CD133以及归巢相关分子VLA4、CXCR4、CD44的表达；通过相关系数分析ROS水平与归巢分子表达之间的相关性.结果表明:PBMNC随冻存时间延长存活率逐渐降低,冻存3、6、9、12个月的细胞存活率比冻前显著降低(P＜0.05)；造血干/祖细胞表面标志性抗原CD34、CD133及归巢相关分子CD44、VLA4、CXCR4表达率随冻存时间的延长有所下降,冷冻保存1年后的表达率比冻存前显著降低(P＜0.05)；随着冷冻保存时间的延长,细胞内ROS水平逐渐升高,冻存6、9、12个月后细胞内ROS水平比冻存前显著升高(P＜0.05).PBMNC内ROS水平与造血干/祖细胞CD34+ VLA4+、CD34+ CXCR4+、CD34+ CD44+双阳性表达率均呈负相关(相关系数分别为-0.503、-0.457、-0.465).结论:造血干/祖细胞的归巢黏附分子表达随冻存时间延长而逐渐下降；冻存的PBMNC中的ROS水平与造血干/祖细胞归巢黏附分子表达率成显著负相关；ROS
作者：王林林；金丽；徐焕铭；郝一文
来源：中国实验血液学杂志 2012 年 20卷 6期
