目的:建立稳定过表达人锌指转录因子Krüppel样因子4(Krüppe-like factor 4,KLF4)基因的K562细胞株,研究KLF4过表达对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响.方法:将过表达KLF4的重组质粒pEGFP-KLF4电穿孔转染白血病K562细胞,G418压力筛选出稳定转染细胞克隆并扩大培养(K562/pEGFP-KLF4组),设pEGFP-C1空质粒转染K562细胞(K562/pEGFP-C1组)及空白K562细胞对照组.应用荧光显微镜观察EGFP-KLF4融合蛋白的表达,Western blot法检测各组细胞中KLF4蛋白表达水平,MTT比色法检测各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况.结果:pEGFP-KLF4重组质粒转染K562细胞后,经G418压力筛选,获得了表达绿色荧光蛋白的稳定细胞株;与对照组相比,K562/pEGFP-KLF4组细胞KLF4的蛋白表达水平明显升高,其过表达率为74.07％ (P ＜0.05);过表达KLF4的K562细胞增殖活力被显著抑制(P＜0.05);过表达KLF4的K562细胞凋亡显著增加(P＜0.05).结论:KLF4过表达可抑制K562细胞的增殖,促进其凋亡.
作者：李波；胡海艳；谭明贤
来源：中国实验血液学杂志 2017 年 25卷 5期
