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目的:观察犀角地黄汤合方含药血清(XJDH)对体外诱导的树突状细胞(DC)相关功能的影响,探讨犀角地黄汤合方治疗ITP的作用机制.方法:采集6名健康志愿者外周血样本,利用密度梯度离心法分离出单个核细胞,利用磁珠分选出CD14+单核细胞,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及重组人白介素4(IL-4)诱导成DC.将DC分为3组:对照组、模型组和XJDH组.通过CCK-8法确定含药血清干预浓度及时间,模型组和XJDH组分别加入终浓度为1 μg/mL的脂多糖(LPS)刺激24 h后诱导DC成熟,对照组、模型组加入正常大鼠血清,XJDH组加入犀角地黄汤合方含药血清均干预24 h.利用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子CD80,CD83,HLA-DR的水平,利用蛋白印迹法(WB)检测细胞TLR4和NF-κB表达情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中IL-6,IL-12,TNF-α的水平.结果:与对照组相比,LPS刺激能够使DC表面分子CD80、CD83、HLA-DR表达增加,TLR4和NF-κB表达随之上升,分泌的相关促炎因子IL-6、IL-12、TNF-α增加(P<0.05).相比于模型组,经XJDH干预后DC表面分子CD80、CD83、HLA-DR表达减少(P<0.05),TLR4、NF-κB蛋白表达下降(P<0.05),DC细胞上清液中IL-6、IL-12、TNF-α水平明显降低(P<0.05).结论:犀角地黄汤合方含药血清可下调TLR4/NF-κB信号通

作者:杨武霞;吴玉红;王梦晓;倪润丰;范栗玮;李润杰;李萌;王爱迪;刘宝山

来源:中国实验血液学杂志 2022 年 30卷 4期

知识库介绍

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杨武霞;吴玉红;王梦晓;倪润丰;范栗玮;李润杰;李萌;王爱迪;刘宝山
来源:
中国实验血液学杂志 2022 年 30卷 4期
标签:
犀角地黄汤合方 免疫性血小板减少症 树突细胞 炎症因子 脂多糖
目的:观察犀角地黄汤合方含药血清(XJDH)对体外诱导的树突状细胞(DC)相关功能的影响,探讨犀角地黄汤合方治疗ITP的作用机制.方法:采集6名健康志愿者外周血样本,利用密度梯度离心法分离出单个核细胞,利用磁珠分选出CD14+单核细胞,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及重组人白介素4(IL-4)诱导成DC.将DC分为3组:对照组、模型组和XJDH组.通过CCK-8法确定含药血清干预浓度及时间,模型组和XJDH组分别加入终浓度为1 μg/mL的脂多糖(LPS)刺激24 h后诱导DC成熟,对照组、模型组加入正常大鼠血清,XJDH组加入犀角地黄汤合方含药血清均干预24 h.利用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子CD80,CD83,HLA-DR的水平,利用蛋白印迹法(WB)检测细胞TLR4和NF-κB表达情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中IL-6,IL-12,TNF-α的水平.结果:与对照组相比,LPS刺激能够使DC表面分子CD80、CD83、HLA-DR表达增加,TLR4和NF-κB表达随之上升,分泌的相关促炎因子IL-6、IL-12、TNF-α增加(P<0.05).相比于模型组,经XJDH干预后DC表面分子CD80、CD83、HLA-DR表达减少(P<0.05),TLR4、NF-κB蛋白表达下降(P<0.05),DC细胞上清液中IL-6、IL-12、TNF-α水平明显降低(P<0.05).结论:犀角地黄汤合方含药血清可下调TLR4/NF-κB信号通