目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞中miR-21的表达及其作用机制.方法:从30例MM患者及20例健康者骨髓标本中分选出浆细胞,检测miR-21的表达水平;选取MM1.S、RPMI-8226和U266细胞,用qRT-PCR方法检测miR-21的水平;转染hsa-miR-21 mimics和hsa-miR-21 inhibitor后通过CCK-8和细胞克隆实验检测MM细胞增殖情况;预测miR-21调控的靶基因,通过荧光酶素报告基因实验检测miR-21与KLF5的结合位点;利用Western blot和qRT-PCR方法检测转染hsa-miR-21 mimics和hsa-miR-21 inhibitor后KLF5蛋白的表达水平;合成缺失3'UTR的KLF5质粒转染进入过表达miR-21的RPMI-8226细胞,利用CCK-8和细胞克隆实验检测MM细胞增殖情况.结果:MM患者浆细胞中miR-21表达水平较正常对照组显著升高(P<0.001);MM1.S、RPMI-8226和U266细胞中miR-21 的表达较对照组也显著升高(P<0.05).转染hsa-miR-21 mimics后细胞增殖和克隆形成数增加,转染hsa-miR-21 inhibitor后细胞增殖能力明显减弱和克隆形成数明显减少(P<0.01);荧光酶素报告基因实验结果显示miR-21直接结合KLF5的3'UTR,转染hsa-miR-21 mimics后KLF5蛋白的表达水平明显减低,转染hsa-miR-21 inhibitor后明显升高;将缺失3'UTR的KLF5质粒转染进入miR-21过表达的RPMI-8226细胞后,细胞增殖和克隆形成数
作者:周楠;曹舒兴;罗建民;刘小军;杨琳
来源:中国实验血液学杂志 2022 年 30卷 5期