目的 利用蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelial cell,hRPE cell)损伤建立年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的实验模型,观察不同浓度的枸杞多糖对hRPE细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,探讨枸杞多糖防治AMD的可行性.方法 通过蓝光诱导建立hRPE细胞光损伤模型,不同浓度的枸杞多糖进行干预.实验分组:A组为正常hRPE细胞,B组(hRPE+光照)为光照损伤组,C组(hRPE+光照+0.01 mg/ml枸杞多糖),D组(hRPE+光照+0.1 mg/ml枸杞多糖),E组(hRPE+光照+1 mg/ml枸杞多糖).倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并检测光照后24h及48h各组细胞的凋亡数及线粒体膜电位.结果 (1)倒置像差显微镜下见正常hRPE细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚.光照损伤组部分细胞体积缩小,变圆,细胞周围见透亮圈;细胞核缩小,出现核边聚,培养液中出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.枸杞多糖干预组少许细胞积缩小,变圆,折光性改变,培养液中未出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.(2) Annexin V-FITC/PI凋亡检测显示A组凋亡细胞数量最少;B组凋亡细胞数量最多;C组、D组及E组凋亡细胞数量与B组细胞差异有统计学意义(P<0.01);E组凋亡细胞数量与A组差异无统计学意义(P>0.05).(3)线粒体膜电位
作者:杜秀娟;董卫红;毕宏生;解孝锋
来源:中国实用眼科杂志 2013 年 31卷 4期