目的 研究核包膜蛋白gp210基因在大肠杆菌中的稳定表达、纯化和免疫学活性鉴定.方法 从人外周血单个核细胞中提取细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增gp210蛋白中含优势表位的基因片段.将该段基因克隆入PET30a表达载体并转化到大肠杆菌BL21中表达.融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE电泳及ELISA方法进行鉴定.结果 在原核表达载体中成功构建了PET30a-gp210重组体.重组体诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子量大约69 kD处有gp210融合蛋白的高效表达,经纯化获得纯度达90
作者:刘镭;孙庆国;李永哲;孙国军;李军红
来源:中国实验诊断学 2007 年 11卷 10期