目的 观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法.方法 从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果.结果 诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长,肝特异性标记物逐渐出现和成熟.AFP在7天时高表达,培养14、21、28天表达逐渐减弱;白蛋白、CK-18和糖原随着诱导时间的延长,表达逐渐增强.结论 密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,是一种较为有效的分离纯化方法.肝衰竭大鼠血清者血清能诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞.
作者:孙庆国;赵文静;王日中;彭慧杰
来源:中国实验诊断学 2007 年 11卷 11期