目的 观察TGF-β1在诱导肾小管上皮细胞转分化过程中对细胞骨架的调节作用.方法 选择正常大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E,经TGF-β1(15 μg/L)体外诱导3天,RT-PCR检测细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)评价细胞的转分化状态,观察细胞形态,同时检测细胞骨架成分β-actin、α-tubulin mRNA的表达;免疫荧光染色观察上述细胞骨架蛋白在细胞内的排列.结果 培养的NRK52E细胞经TGF-β1体外诱导3天后,细胞中α-SMA mRNA的表达水平明显增多,高于相应的对照组细胞(P＜0.001),说明NRK52E上皮细胞出现了表型转化,此时培养细胞的形态也发生了改变,由典型的鹅卵石样变为成纤维细胞样,并有多个突起;细胞骨架蛋白β-actin mRNA的表达也明显增多(P＜0.05);β-actin蛋白的排列也发生了改变,其在胞膜下形成的厚的板样结构消失,转而在胞浆中形成粗大的束状应力纤维,沿细胞长轴纵行排列,此外,β-actin尚在某些细胞边缘形成了片层样伪足和丝状伪足.微管成分α-tubulin mRNA的表达和分布与对照组比较无明显不同.结论 TGF-β1能够诱导体外培养的NRK52E细胞转分化,在此过程中细胞形态发生了改变,骨架蛋白β-actin的表达增多并发生了重建,同时骨架蛋白α-tubulin未见明显变化.
作者：王光兰；王心蕊；陈爽；刘晓会；张丽红；孙华君；石英爱；吴珊
来源：中国实验诊断学 2010 年 14卷 3期
