目的 构建Syk基因逆转录病毒载体,并观察其对人结肠癌细胞生物学特性的影响.方法 通过RT-PCR扩增出Syk基因的部分cDNA片段,将其插入到逆转录病毒载体pLNCX上,构建成Syk基因的表达载体,并经酶切鉴定和测序确认.将Syk基因表达载体经脂质体介导转染人结肠腺癌细胞系LoVo,筛选出Syk基因稳定表达的细胞株,通过Southern blot检测Syk基因的整合;RT-PCR及DNA测序法检测Syk基因的转录;通过Western blot检测转染细胞Syk基因的表达;二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖.结果 Syk基因已整合入细胞并获稳定表达,并显著抑制人结肠腺癌细胞LoVo的增殖.结论 Syk基因逆转录病毒载体通过外源Syk基因mRNA水平的表达,从而抑制人结肠腺癌细胞的生长.
作者：于庆功；常慧丽；李明强；舒敏；王伟；刘春英
来源：中国实验诊断学 2010 年 14卷 11期
