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目的:探讨 IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化及与 p63的关系。方法原代分离培养野生型(wildtype, WT)和 Ikkɑ基因敲除小鼠(Ikkα-/-)的表皮角朊细胞(WT-KTC 及 Ikkα-/-KTC),Western blot 检测 Ikkα-/-中 p63的表达。含0.5mM Ca2+培养基刺激分化后,免疫荧光染色观察分化标记物 Zonula occludens-1(ZO-1)及增殖标记物 BrdU 的表达。制备沉默 p63表达的慢病毒并感染 Ikkα-/-KTC,观察其增殖及分化能力的变化。结果在正常培养条件下,Ikkα-/-KTC中 BrdU 阳性细胞率显著高于 WT-KTC(P <0.05)。Ikkα-/-KTC 中 p63高表达。高钙条件刺激分化后,WT-KTC 中 Br-dU 表达显著降低,表达 ZO-1;而 Ikkα-/-KTC 的 BrdU 表达无明显变化;且无 ZO-1的表达。将表达 shRNA p63的慢病毒感染 Ikkα-/-KTC 沉默 p63后,含0.5 mM Ca2+培养基刺激细胞,Ikkα-/-KTC 中 BrdU 的表达显著降低,不表达分化标记物 ZO-1。结论IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化,且其对增殖的调控通过 p63信号通路。

作者:沈燕君;辛颖;周彤;孙小梅;姜新

来源:中国实验诊断学 2016 年 2期

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作者:
沈燕君;辛颖;周彤;孙小梅;姜新
来源:
中国实验诊断学 2016 年 2期
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IKKɑ 角朊细胞 增殖 分化 p63 IKKɑ keratinocyte proliferation differentiation p63
目的:探讨 IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化及与 p63的关系。方法原代分离培养野生型(wildtype, WT)和 Ikkɑ基因敲除小鼠(Ikkα-/-)的表皮角朊细胞(WT-KTC 及 Ikkα-/-KTC),Western blot 检测 Ikkα-/-中 p63的表达。含0.5mM Ca2+培养基刺激分化后,免疫荧光染色观察分化标记物 Zonula occludens-1(ZO-1)及增殖标记物 BrdU 的表达。制备沉默 p63表达的慢病毒并感染 Ikkα-/-KTC,观察其增殖及分化能力的变化。结果在正常培养条件下,Ikkα-/-KTC中 BrdU 阳性细胞率显著高于 WT-KTC(P <0.05)。Ikkα-/-KTC 中 p63高表达。高钙条件刺激分化后,WT-KTC 中 Br-dU 表达显著降低,表达 ZO-1;而 Ikkα-/-KTC 的 BrdU 表达无明显变化;且无 ZO-1的表达。将表达 shRNA p63的慢病毒感染 Ikkα-/-KTC 沉默 p63后,含0.5 mM Ca2+培养基刺激细胞,Ikkα-/-KTC 中 BrdU 的表达显著降低,不表达分化标记物 ZO-1。结论IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化,且其对增殖的调控通过 p63信号通路。