目的：本研究探讨 hTERT基因沉默后对乳腺癌细胞生物学特性及环氧化酶-2（COX-2）的影响。方法设计合成特异性针对 hTERT mRNA的 siRNA，电转染入乳腺癌细胞，以致目的基因沉默。应用 RT-PCR及 Western blot法检测沉默 hTERT基因后乳腺癌 MCF-7细胞的mRNA及蛋白的表达状况；应用流式细胞仪检测细胞周期；并通过CCK-8增殖实验检测沉默 hTERT基因后乳腺癌 MCF-7细胞的增殖能力；经小室侵袭实验检测沉默 hTERT基因后乳腺癌 MCF-7细胞的侵袭能力。利用免疫组织化学法检测 COX-2蛋白的表达。结果 hTERT基因沉默48 h后，hTERT转染组在沉默 hTERT基因后乳腺癌 MCF-7细胞的mRNA及蛋白表达呈现明显降低（P＜0．05）；细胞周期检测结果示乳腺癌 MCF-7肿瘤干细胞停滞在 G0／G1周期，S期的细胞数目减低，三组比较统计学差异明显（P＜0.05）；CCK-8增殖实验结果表明乳腺癌 MCF-7肿瘤干细胞在 hTERT转染组的增殖得到显著抑制（P＜0．05）；小室侵袭实验结果表明，hTERT转染组穿过滤膜的细胞数量明显减少（P＜0．05）；免疫组织化学法检测结果显示，COX-2蛋白在 hTERT转染组的表达明显降低，并与 hTERT基因的表达相关联。结论 hTERT基因沉默后对乳腺癌细胞的增值和迁移能力均有影响，并能降低COX-2蛋白的表达，从而改善
作者：于宏建；赵杨；赵世铭；马洪奎；李光
来源：中国实验诊断学 2016 年 20卷 11期
