目的 研究刺五加皂苷对APP(Amyloid Precursor Protein,APP)酶解通路的影响.方法 (2015.9-2016.5)用12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L刺五加皂苷处理胚鼠皮层神经元细胞,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测γ-分泌酶活性;另用脂质体2000转染构建APP695高表达CHO细胞系,用G418(500 mg/L)进行筛选获得APP695-CHO稳转染细胞,用12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L刺五加皂苷处理稳转染细胞,48 h后,ELISA法检测细胞培养上清中Aβ1-40含量,用Western-blot法检测细胞裂解液中APP-N端片段蛋白的表达.结果 在胚鼠皮层神经元细胞与对照组相比,25 mg/L、50 mg/L的刺五加皂苷能够抑制内源性 γ-内切酶的活性,而且随着浓度的升高,抑制作用增强;在APP695-CHO稳转染细胞中,Aβ1-40的分泌量增高,APP-N端片段的蛋白表达水平减少,不同剂量刺五加皂苷能缓解这些变化.结论 刺五加皂苷能抑制内源性 γ-内切酶减少Aβ1-40的生成,对APP酶解起到一定的影响,对阿尔茨海默病的发病及进展有一定的保护作用.
作者:刘芳;李净洋;邱烨;许妍姬
来源:中国实验诊断学 2017 年 21卷 12期