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目的 探讨长链非编码RNA XIST海绵miR-34促进结肠癌进展的机制;方法 以人类结肠癌组织和相应的非肿瘤组织为研究对象,对人结肠癌细胞系(SW480,HCT116与HT29)和正常结肠上皮细胞系NCM460进行培养和转染,分别对细胞增殖能力、菌落形成能力、细胞迁移能力进行测定,利用qRT-PCR对mRNA表达量进行测定;荧光素酶报告分析实验检测荧光素酶活性;通过Western blotting分析对细胞捏蛋白表达量进行测定;利用动物实验进行皮下异种移植,测定肿瘤重量.结果 XIST在结肠癌组织中的表达高于癌旁组织,XIST上调与晚期TNM分期、淋巴管及远处转移呈正相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无相关性;结肠癌细胞系的XIST表达水平与正常细胞系相比上调,XIST沉默抑制了细胞的入侵能力;结肠癌组织中miR-34a水平降低,荧光素转运体实验证实了在miR-34模拟物和XIST野生型中荧光强度降低的结合;miR-34a抑制剂能够缓解si-XIST对细胞增殖的抑制作用且对两个细胞集落数和迁移数的抑制作用;WNT1水平在结肠癌组织中高于相邻正常组织;si-XIST能抑制c-Myc、cy-clinD1和MMP-7的表达.结论 XIST通过激活WNT/β-catenin信号通路调节结肠癌细胞的增殖和侵袭.

作者:洪森;李世权;刘涛;康振华

来源:中国实验诊断学 2020 年 24卷 8期

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作者:
洪森;李世权;刘涛;康振华
来源:
中国实验诊断学 2020 年 24卷 8期
标签:
长链非编码RNA XIST Wnt/β-catenin信号通 结肠癌
目的 探讨长链非编码RNA XIST海绵miR-34促进结肠癌进展的机制;方法 以人类结肠癌组织和相应的非肿瘤组织为研究对象,对人结肠癌细胞系(SW480,HCT116与HT29)和正常结肠上皮细胞系NCM460进行培养和转染,分别对细胞增殖能力、菌落形成能力、细胞迁移能力进行测定,利用qRT-PCR对mRNA表达量进行测定;荧光素酶报告分析实验检测荧光素酶活性;通过Western blotting分析对细胞捏蛋白表达量进行测定;利用动物实验进行皮下异种移植,测定肿瘤重量.结果 XIST在结肠癌组织中的表达高于癌旁组织,XIST上调与晚期TNM分期、淋巴管及远处转移呈正相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无相关性;结肠癌细胞系的XIST表达水平与正常细胞系相比上调,XIST沉默抑制了细胞的入侵能力;结肠癌组织中miR-34a水平降低,荧光素转运体实验证实了在miR-34模拟物和XIST野生型中荧光强度降低的结合;miR-34a抑制剂能够缓解si-XIST对细胞增殖的抑制作用且对两个细胞集落数和迁移数的抑制作用;WNT1水平在结肠癌组织中高于相邻正常组织;si-XIST能抑制c-Myc、cy-clinD1和MMP-7的表达.结论 XIST通过激活WNT/β-catenin信号通路调节结肠癌细胞的增殖和侵袭.