目的 研究APN对糖尿病患者内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移能力的影响并探讨其可能机制. 方法 利用密度梯度离心法分离、培养T2DM患者外周血单个核细胞,经FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色鉴定为正在分化的EPCs.将分离、培养的EPCs分为对照(Con)组、APN组(10μg/ml)、PI3K抑制剂(Ly294002)干预组及ERK抑制剂(PD98059)干预组.采用MTT比色法、细胞集落形成单位计数等方法观察各组EPCs增殖能力的变化情况,应用Transwell小室法分析EPCs迁移能力的变化,同时本研究采用免疫蛋白印迹法观察APN处理EPCs后磷酸化Akt,以及磷酸化eNOS的表达变化情况,以探讨其可能机制. 结果 与Con组相比,APN组EPCs的增殖能力显著提高,而在PI3K抑制剂干预组,APN对EPCs增殖、迁移活性的改善作用受到抑制.另外,免疫蛋白印迹法的结果显示:相比于Con组,APN组p-Akt、p-eNOS的表达水平明显增高,而PI3K抑制剂干预后能够有效地抑制APN促Akt磷酸化的效应. 结论 APN促进糖尿病患者EPCs增殖、迁移等功能,其主要机制可能与PI3K/Akt/eNOS的信号通路激活有关.
作者：曹政；王林；杨勇；吴瑞霞；陈彬；谢华强；华先平
来源：中国糖尿病杂志 2012 年 20卷 9期
