目的 探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)在结肠癌耐药中的作用.方法 应用免疫组织化学(免疫组化)SP法检测61例结肠癌组织及32例癌旁组织中DAPK的表达.以氟尿嘧啶(5-FU)诱导建立的结肠癌耐药细胞系HCT116/5-FU为模型.通过转染DAPK-siRNA下调DAPK的表达(DAPK-siRNA组),转染FAM-siRNA(FAM-siRNA组)作为对照;通过过表达载体上调DAPK的表达(DAPK过表达组).采用实时定量荧光PCR及蛋白质印迹法检测3组的DAPK、多药耐药蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的mRNA及蛋白表达水平;MTT法及流式细胞法分别测定3组细胞在未经5-FU处理及浓度为8 μg/ml的5-FU处理下的细胞增殖和凋亡情况.结果 DAPK在结肠癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织[18.0％(11/61)比90.6％(29/32),P＜0.05].与FAM-siRNA组比较,DAPK-siRNA组细胞中DAPK mRNA水平及蛋白表达水平均明显降低,DAPK过表达组则均显著升高(均P＜0.05).在5-FU处理下,相比FAM-siRNA组,DAPK过表达组细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高(均P＜0.05);DAPK-siRNA组细胞增殖和细胞凋亡率均无明显变化(均P＞0.05).与FAM-siRNA组比较,DAPK过表达组两种耐药蛋白的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05),而DAPK-siRNA组与FAM-siRNA组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DAPK能够抑制结肠癌耐

作者：付强；张永磊；成静；陈小兵；谢建国；罗素霞

来源：中华胃肠外科杂志 2014 年 17卷 11期