目的:应用聚合酶链反应(PCR)连接的限制性片段长度多态性(RELP)技术进行乙型流感病毒及其巴拿马株与维多利亚株两大谱系的鉴别.方法:根据GenBank中登录乙型流感病毒血凝素(HA)区域的核苷酸序列,应用软件进行序列比对,根据HA基因的保守区设计、筛选引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增流感病毒HA基因,用限制性内切酶HindⅢ酶切扩增产物并进行琼脂糖凝胶电泳,同时对检测方法进行特异性和灵敏性实验.结果:该方法对乙型流感病毒有特异性,与甲1和甲3型流感病毒无交叉反应.维多利亚株和巴拿马株HA基因均能被特异性引物所扩增,扩增产物经HindⅢ酶切后,乙型流感病毒巴拿马株在电泳谱上出现603 bp与242bp的两个可见片段,而维多利亚株因无HindⅢ酶切位点,仍呈872 bp的一个片段.该方法检测敏感度可达0.1 TCID50.结论:该方法是一种灵敏度高、特异性强的乙型流感病毒维多利亚株与巴拿马株鉴别的方法.
作者：姚栩；张彩云；陈智伟；杨建娜；郑能雄
来源：中国卫生检验杂志 2007 年 17卷 11期
