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目的 通过shRNA沉默吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)基因表达,研究IDO表达在体外对NK细胞杀伤能力的作用.方法 shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞SKOV-3,应用Western blot检测IDO在SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性.结果 IDO蛋白在SKOV-3/shIDO细胞中表达被抑制,在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达.3组肿瘤细胞体外生长曲线比较差异无统计学意义(P>0.05).SKOV-3/shIDO细胞存活的百分比明显低于其他2组对照(SKOV-3和SKOV-3/Mock)细胞,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染卵巢癌细胞SKOV-3,获得IDO无表达卵巢癌细胞SKOV-3/shIDO,结果显示抑制IDO表达对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但可增强卵巢癌细胞SKOV-3对NK细胞杀伤作用的敏感性.因此,IDO可以作为卵巢癌基因治疗的潜在新靶点,shRNA沉默IDO基因表达可以作为卵巢癌治疗的新方法.

作者:王冬冬;王晓黎;张淑兰

来源:中国微生态学杂志 2012 年 24卷 4期

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作者:
王冬冬;王晓黎;张淑兰
来源:
中国微生态学杂志 2012 年 24卷 4期
标签:
吲哚胺2,3-双加氧酶 卵巢癌 基因治疗 NK细胞
目的 通过shRNA沉默吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)基因表达,研究IDO表达在体外对NK细胞杀伤能力的作用.方法 shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞SKOV-3,应用Western blot检测IDO在SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性.结果 IDO蛋白在SKOV-3/shIDO细胞中表达被抑制,在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达.3组肿瘤细胞体外生长曲线比较差异无统计学意义(P>0.05).SKOV-3/shIDO细胞存活的百分比明显低于其他2组对照(SKOV-3和SKOV-3/Mock)细胞,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染卵巢癌细胞SKOV-3,获得IDO无表达卵巢癌细胞SKOV-3/shIDO,结果显示抑制IDO表达对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但可增强卵巢癌细胞SKOV-3对NK细胞杀伤作用的敏感性.因此,IDO可以作为卵巢癌基因治疗的潜在新靶点,shRNA沉默IDO基因表达可以作为卵巢癌治疗的新方法.