目的 建立一种基于尼龙膜的反向斑点杂交法,用于检测乙型肝炎病毒(HBV)基本核心启动子区(BCP)A1762T/G1764A突变.方法 根据我国HBV主要流行的基因型为B和C,从GenBank上查出4种HBV BCP序列.利用在线工具Clustal W进行比对,针对该突变位点设计引物和检测探针.探针经合成和修饰后点在带正电的尼龙膜上.将反向斑点杂交法结合地高辛检测试剂盒用于检测A1762T/G1764A突变,以测序法确定该区域序列的标本为检测对象.结果 反向斑点杂交法分别检测5例A 1762/G1 764病毒株、2例T1762/G1764病毒株、5例A1762/A1764病毒株和4例T1762/A1764病毒株,结果与测序完全相同.结论 应用本方法可以快速、准确地HBV相关的热点突变.
作者：张卫英；陈岳明；项国谦；王贤军
来源：中国微生态学杂志 2012 年 24卷 6期
