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目的:探讨反义RNA对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na+/H+交换器(NHE)-1表达和活性、细胞内pH(pHi)的影响,及其与细胞增殖的关系.方法:构建含NHE-1反义RNA序列的pLXSN反转录病毒重组载体,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞,G418筛选后获取含有重组载体的细胞克隆,检测细胞NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量、pHi和3H-TdR掺入量.结果:与转染pLXSN空载体的细胞和正常对照组细胞比较,转染了重组载体的肺动脉平滑肌细胞中NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量明显减少,同时伴有pHi降低和3H-TdR掺入量减少,正常对照组和空载体组间无显著差异.结论:NHE-1反义RNA可以减少NHE-1表达,从而诱导细胞酸化,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖.

作者:姚伟;陆俊羽;钱桂生;杨晓静

来源:中国危重病急救医学 2002 年 14卷 9期

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作者:
姚伟;陆俊羽;钱桂生;杨晓静
来源:
中国危重病急救医学 2002 年 14卷 9期
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反义RNA Na+/H+交换器 肺动脉平滑肌细胞 增殖
目的:探讨反义RNA对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na+/H+交换器(NHE)-1表达和活性、细胞内pH(pHi)的影响,及其与细胞增殖的关系.方法:构建含NHE-1反义RNA序列的pLXSN反转录病毒重组载体,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞,G418筛选后获取含有重组载体的细胞克隆,检测细胞NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量、pHi和3H-TdR掺入量.结果:与转染pLXSN空载体的细胞和正常对照组细胞比较,转染了重组载体的肺动脉平滑肌细胞中NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量明显减少,同时伴有pHi降低和3H-TdR掺入量减少,正常对照组和空载体组间无显著差异.结论:NHE-1反义RNA可以减少NHE-1表达,从而诱导细胞酸化,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖.