目的 探讨细菌脂蛋白(BLP)耐受所致核转录因子-κB(NF-κB)活化受抑制的分子机制.方法 以不同浓度BLP(10、100、1 000 ng/ml)预处理人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)诱导BLP耐受,再以不同浓度BLP(0、10、100、1 000 ng/m1)刺激经BLP预处理(耐受组)或未经BLP预处理(对照组)的THP-1细胞,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放,确定最适的BLP预处理和刺激浓度.然后按此条件处理细胞不同时间(0、0.5、1、2、6 h)并提取蛋白,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测NF-κB亚单位p50和p65的表达、核转位及磷酸化情况.结果 对照组中10、100、1 000 ng/mlBLP可剂量依赖性刺激THP-1活化并产生TNF-α(pg/ml:184.86±32.51、3 215.88±167.09、6 042.96±245.37),耐受组中100 ng/ml BLP预处理几乎完全抑制不同剂量BLP诱导的TNF-α释放.故最适BLP预处理浓度为100 ng/ml,刺激浓度为1 000 ng/ml.Western blotting检测表明,在BLP耐受的细胞质中p50蛋白表达明显高于对照组(0 h:542.9±15.6比272.8±13.2,0.5 h:558.0±16.9比236.4±11.8,1 h:524.7±17.5比211.6±9.8,2 h:584.9±15.6比222.4±12.3,均P＜0.01),而两组间p65蛋白无明显差异.BLP刺激还可诱导对照组细胞中p50和p65发生核转

作者：高丽杰；李崇辉；汪江淮；黄志强

来源：中国危重病急救医学 2011 年 23卷 5期