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目的 探讨胰岛素对烧伤血清致心肌细胞凋亡的保护作用及机制.方法 通过烧伤血清作用的心肌细胞模型,用胰岛素及其信号通路抑制剂SB203580、LY294002进行干预.蛋白质免疫印迹法检测心肌细胞内活化型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、Bax和磷酸化核转录因子-κB抑制因子α(p-IκBα)的表达;定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达;Hoechst 33258核染色法检测心肌细胞凋亡.同时通过阻断实验,初步研究胰岛素保护心肌细胞作用的信号通路.结果 胰岛素能够明显降低烧伤血清作用的心肌细胞cleaved-caspase-3(2.22±0.30比4.84±0.74,P<0.01)、Bax(1.33±0.35比3.74±0.65,P<0.01)和p-IκBα( 1.43±0.62比3.62±0.74,P<0.01)的表达;显著抑制TNF-α表达(0.72±0.27比2.02±0.63,P<0.01);降低心肌细胞的凋亡率[(9.4±3.4)%比(19.1±5.6)%,P<0.01].阻断实验结果显示,胰岛素活化磷酯酰肌醇-3-激酶/蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)通路的抑制剂LY294002能够抵消胰岛素的保护作用;而p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)通路活化抑制剂SB203580则能够抑制烧伤血清引起的心肌细胞损害,与胰岛素作用相当.结论 在烧伤血清作用的心肌细胞模型,胰岛素可能通过对PI3K/Akt

作者:吕根法;石宏伟;王光远;樊磊;胡大海;陈璧

来源:中国危重病急救医学 2012 年 24卷 4期

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作者:
吕根法;石宏伟;王光远;樊磊;胡大海;陈璧
来源:
中国危重病急救医学 2012 年 24卷 4期
标签:
胰岛素 烧伤 心肌细胞 凋亡 肿瘤坏死因子-α Insulin Burn Cardiocyte Apoptosis Tumor necrosis factor-α
目的 探讨胰岛素对烧伤血清致心肌细胞凋亡的保护作用及机制.方法 通过烧伤血清作用的心肌细胞模型,用胰岛素及其信号通路抑制剂SB203580、LY294002进行干预.蛋白质免疫印迹法检测心肌细胞内活化型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、Bax和磷酸化核转录因子-κB抑制因子α(p-IκBα)的表达;定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达;Hoechst 33258核染色法检测心肌细胞凋亡.同时通过阻断实验,初步研究胰岛素保护心肌细胞作用的信号通路.结果 胰岛素能够明显降低烧伤血清作用的心肌细胞cleaved-caspase-3(2.22±0.30比4.84±0.74,P<0.01)、Bax(1.33±0.35比3.74±0.65,P<0.01)和p-IκBα( 1.43±0.62比3.62±0.74,P<0.01)的表达;显著抑制TNF-α表达(0.72±0.27比2.02±0.63,P<0.01);降低心肌细胞的凋亡率[(9.4±3.4)%比(19.1±5.6)%,P<0.01].阻断实验结果显示,胰岛素活化磷酯酰肌醇-3-激酶/蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)通路的抑制剂LY294002能够抵消胰岛素的保护作用;而p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)通路活化抑制剂SB203580则能够抑制烧伤血清引起的心肌细胞损害,与胰岛素作用相当.结论 在烧伤血清作用的心肌细胞模型,胰岛素可能通过对PI3K/Akt