目的 探讨脂多糖(LPS)所致大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)炎性损伤中小窝蛋白-1(Cav-1)的作用机制.方法 将体外培养的RPMVEC,分别进行LPS刺激时效实验和蛋白激酶A(PKA)通路干预实验.①时效实验:以10 μg/mL LPS分别刺激0、1、3、6、12、24h后进行细胞单层通透性(伊文思蓝-白蛋白法)和Cav-1蛋白表达[蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)]检测;并于LPS刺激0、10、30、60、90、120 min检测细胞磷酸化小窝蛋白-1(p-Cav-1)表达(Western blotting).②干预实验:以10μmol/L蛋白激酶A特异抑制剂(PKI)与RPMVEC预孵育30m in后再加入10 μg/mL LPS继续孵育,30 min后检测p-Cav-1表达,3h后检测细胞单层通透性及Cav-1蛋白表达;设未刺激组和LPS或PKI单独刺激组为对照.结果 ①LPS刺激RPMVEC后1 h Cav-1蛋白表达(积分A值)即开始上升(2.97±0.07),3h达峰值(3.77±0.37),之后逐渐下降,但至24 h时(1.45±0.18)仍明显高于LPS刺激0h时(1.12±0.08),组间比较差异有统计学意义(F=178.047,P=0.000);LPS可呈时间依赖性(0、1、3、6、12、24h)增加RPMVEC通透性(A值),变化趋势与Cav-1蛋白表达一致,分别为(99.67±4.32)％、(118.17±2.32)％、(159.00±2.61)％、(141.17±2.64)％、(120.17±2.79)％、(108.83±2.04)％,组间比较差异有

作者：尤青海；张丹；孙耕耘；岳扬；徐秀娟

来源：中华危重病急救医学 2013 年 25卷 12期