目的：探讨自噬诱导剂雷帕霉素对脓毒症急性肾损伤（AKI）的保护作用。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、盲肠结扎穿孔术（CLP）模型组和雷帕霉素干预组（Rap干预组），每组8只。采用CLP建立脓毒症AKI大鼠模型；Sham组仅分离盲肠但不进行盲肠结扎穿刺。Rap干预组于制模后立即腹腔注射1.6mg雷帕霉素；CLP模型组注射等量生理盐水。各组于制模24h取外周血后处死大鼠，检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）水平；过碘酸雪夫染色（PAS染色）后光镜下观察肾组织病理形态学改变；通过实时聚合酶链反应（real-timePCR，RT-PCR）检测肾小管自噬相关基因Atg-5、Beclin-1的mRNA表达；蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测肾小管自噬体膜标志蛋白微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）、Beclin-1及凋亡相关蛋白细胞色素C（CytC）、Bax、Bcl-2的表达；原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。结果雷帕霉素可有效抑制脓毒症AKI大鼠肾组织病理学改变，降低BUN、SCr水平。CLP模型组肾小管Atg-5、Beclin-1、LC3-Ⅱ表达均较Sham组明显升高〔Atg-5mRNA（2-ΔΔCt）：2.34±0.04比1.00±0.03， Beclin-1mRNA（2-ΔΔCt）：1.40±0.02比1.00±0.03，LC3-Ⅱ蛋白（灰度值）：0.82±0.03比0.45
作者：王睿；龚晓莹；秦含玉；李国福
来源：中华危重病急救医学 2016 年 28卷 10期
