目的 探讨线粒体自噬在呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用及其机制.方法 将36只SPF级SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸组(CON组)、正常潮气量(VT)组(NVT组,VT为8 mL/kg)、大VT组(HVT组,VT为40 mL/kg)3组,每组12只.所有大鼠均气管切开后行气管插管,CON组保持自主呼吸,NVT组和HVT组分别给予相应VT的机械通气.通气4 h后收集血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本,测定肺组织湿/干重比值(W/D),分别于光镜和透射电镜下观察肺组织病理学改变和Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)超微结构改变;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清和BALF中白细胞介素(IL-1β、IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用BCA法测定BALF中总蛋白水平,并进行细胞计数;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)分别检测肺组织中微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、线粒体DNA编码的细胞色素C氧化酶Ⅳ(COX-Ⅳ)和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的mRNA及蛋白表达.结果 CON组和NVT组肺组织及AECⅡ超微结构基本正常,HVT组则有明显的炎症性改变和病理学损伤.与CON组和NVT组比较,HVT组肺组织W/D比值明显升高(8.53±1.05比5.12±0.65、5.57±0.55,均P<0.05),BALF中总蛋白、渗出细胞、IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显
作者:荆忍;潘灵辉
来源:中华危重病急救医学 2017 年 29卷 1期