目的 探讨波动性高糖对氧糖剥夺/再复供(OGD/R)后神经元存活的影响.方法 原代培养小鼠海马神经元,待细胞融合达到80％左右时传代培养.取对数生长期细胞置于缺氧状态(37℃、5％ CO2、95％ N2)的培养箱中模拟细胞缺氧,将培养液更换为无糖Hank平衡盐溶液(HBSS)模拟细胞缺糖;设常糖常氧对照组.细胞缺氧缺糖处理6h后,倒置相差显微镜下观察细胞形态,用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测细胞活性,再进行分组实验.将细胞随机分为4组,分别采用含不同浓度葡萄糖培养基,置于常氧、5％ CO2、37℃培养条件下继续培养72 h,制备OGD/R模型模拟细胞缺血/再灌注.低糖对照组用含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基培养;恒定高糖组用含33.0 mmol/L葡萄糖的培养基培养;波动高糖组日间用含33.0 mmol/L葡萄糖的培养基培养3h,再用含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基培养2h,交替3次,夜间用含33.0 mmol/L葡萄糖的培养基过夜;高渗对照组用含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基与甘露醇配制,渗透压与恒定高糖组相同,有效糖浓度与常糖常氧对照组相同,以排除高糖培养基引起的渗透压变化对结果的影响.各组细胞培养72 h后,倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变;用CCK-8试剂盒测定细胞活性;用流式细胞术测定细胞凋亡率.结果 倒置相差显微镜下显示,常糖常氧对照组细胞饱满,
作者：陈秋月；张丹红；王莉；张叶青；陈慧红；陈富强；何泽宝
来源：中华危重病急救医学 2019 年 31卷 1期
