目的 探讨调控Hippo信号通路在体内环境中促进间充质干细胞(MSC)修复急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺损伤的作用机制.方法 通过慢病毒载体转染构建低表达大肿瘤抑制因子2(LATS2)的小鼠骨髓MSC(mMSCs)细胞株.按照随机数字表法将6～8周龄雄性C57BL/6小鼠分为4组,每组36只.通过气道内注入2 g/L脂多糖(LPS)50 μL制备ARDS动物模型(ARDS组);生理盐水(NS)对照组注入等体积NS.制模后4 h,通过气道移植5×104个含空干扰病毒转染的mMSCs(MSC-shcontrol组)或低表达LATS2的mMSCs (MSC-shLATS2组);NS对照组和ARDS组则注入等量磷酸盐缓冲液(PBS).制模后3、7、14 d分别处死小鼠并收集肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF),采用近红外荧光成像、免疫荧光染色及蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)评估mMSCs在肺组织的存留及向Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)分化情况;测定肺组织湿重/体重比值(LWW/BW)及BALF中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量以评价mMSCs对肺水肿的改善效应;用Western Blot检测肺上皮紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)的表达以反映mMSCs对上皮细胞通透性的影响;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)水平以评估mMSCs对肺组织炎症反应的影响;对肺组织分别进行苏木素-伊红(HE)染色及改良Masson染色并

作者：李朗；董亮；高飞；惠姣洁；陈意喆；严洁

来源：中华危重病急救医学 2019 年 3期