目的 探讨细胞自噬对神经病理性疼痛(NP)大鼠N -甲基- D -天冬氨酸(NMDA)受体及其亚基NR2B和行为学的调控作用.方法 将雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、NP组、自噬抑制剂3 -甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组(3-MA+NP组)和自噬激动剂雷帕霉素(Rap)预处理组(Rap+NP组),每组22只.采用结扎坐骨神经的方法制备NP动物模型;Sham组仅暴露坐骨神经但不结扎.两个预处理组分别于术前1 h腹腔注射3-MA 15 mg/kg或Rap 10 mg/kg.各组大鼠于术前及术后1、3、7、14 d检测行为学指标机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).各组于术后1 d、7 d取脊髓组织,透射电镜下观察自噬体形成情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 -Ⅱ(LC3 -Ⅱ)、Beclin1以及NMDA和NR2B亚基的表达;采用免疫荧光法检测LC3的阳性表达.结果 与 Sham组比较,NP组大鼠MWT随术后时间延长逐渐下降,TWL逐渐缩短;且1 d时自噬体及脊髓背角LC3 -Ⅱ、Beclin1、NMDA、NR2B蛋白表达和LC3阳性表达即明显增加,并持续至7 d,说明NP可导致痛敏发生并激活自噬活性.给予3-MA预处理可使NP大鼠MWT进一步降低、TWL进一步缩短,自噬体减少,脊髓背角LC3 -Ⅱ、Beclin1表达下降,NMDA、NR2B表达进一步增加,术后1 d与NP组比较差异即有统
作者：田礼华；张杨；谢克亮；陈红光
来源：中华危重病急救医学 2019 年 3期
