目的:在毕赤酵母菌(GS115)中表达有活性的重组人分泌型血管内皮抑素蛋白,探讨其对鼠移植性肝癌的抑制作用.方法:成功构建的分泌型酵母表达载体,经电转化法转入酵母菌中,SDS-PAGE电泳筛选阳性重组子,经Heparin亲和层析柱进行初步纯化.MTT法测定重组人血管内皮抑素对脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)增殖的抑制作用;HepG2.2.15细胞注射裸鼠成瘤后,体内验证重组蛋白的抑瘤活性.结果:构建的酵母表达载体经PCR、测序鉴定完全正确.SDS-PAGE电泳证实重组菌较空白菌多一明显条带,Heparin亲和层析后,1M NaCl洗脱的蛋白峰在体外可特异性抑制血管内皮细胞的增殖,体内可明显抑制鼠移植性肝癌的生长,并诱导肿瘤细胞凋亡.结论:在毕赤酵母菌中成功表达了有活性的重组血管内皮抑素蛋白,对肿瘤治疗具有很好的开发前景.
作者：王晓燕；孙汶生；马春红；张利宁；李欣；刘素侠；曹英林
来源：中国现代普通外科进展 2002 年 5卷 3期
