目的 通过体外细胞实验观察BRIX1基因对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖与凋亡的影响. 方法 将MDA-MB-231细胞株分为实验组(shBRIX1组)及对照组(shCtrl组).shBRIX1组采用构建敲低BRIX1基因表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞,以敲低BRIX1表达;shCtrl组采用慢病毒空载体转染MDA-MB-231细胞.应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及Western Blot方法检测两组的转染效率;采用Celigo细胞成像技术、噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验连续5 d检测两组细胞的增殖情况;采用细胞克隆实验检测细胞克隆形成数;采用流式细胞仪荧光分选(fluorescence acti-vated cell sorting,FACS)技术和Caspase3/7活性检测比较两组细胞的凋亡能力. 结果 与shCtrl组细胞相比,敲低BRIX1表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞72 h后,RT-qPCR检测shBRIX1组中细胞的BRIX1基因表达水平明显下降(P<0.05);Western Blot检测shBRIX1组细胞中的BRIX1蛋白表达水平下降.敲低BRIX1后,Celigo、MTT及细胞克隆实验结果显示从第二天开始MDA-MB-231细胞增殖能力较shCtrl组明显下降(P<0.01);FACS实验及Caspase3/7活性检测结果显示敲低BRIX1组的
作者:简文静;冯清枝;盛海艳;刘国文
来源:中国现代手术学杂志 2022 年 26卷 2期