目的:通过原核表达并纯化GPC3蛋白,免疫家兔获得抗-GPC3多克隆抗体,为深入研究gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础.方法:将gpc3/mxr7基因片段亚克隆至pPROEXTMHTb原核表达载体,采用融合6-his的融合蛋白方法原核表达GPC3蛋白质,纯化蛋白后免疫家兔,鉴定并纯化出抗-GPC3多克隆抗体.结果:原核诱导表达出GPC3蛋白,免疫家兔后获得多克隆抗体,经鉴定为抗一GPC3特异性多克隆抗体,并能识别原核、真核表达的外源性及HepG2和Hu-h7细胞内源性GPC3蛋白.结论:GPC3蛋白多克隆抗体能特异识别GPC3蛋白,可应用于gpc3/mxr7基因的功能研究,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物.
作者:李慎菁;秦建民;满晓波;王红阳;邱秀华;吴孟超
来源:中国现代医学杂志 2003 年 13卷 8期