目的构建人P58.1基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在淋巴细胞中的表达.方法由逆转录病毒载体pMSCV介导,将白血病受者的P58.1基因导入健康供者的淋巴细胞中,并用逆转录聚合酶链式反应和流式细胞仪检测转染后基因的表达.结果测序及Bgl Ⅱ、EcoRⅠ双酶切鉴定证实,获得了P58.1基因且已正确插入载体pMSCV.流式细胞仪检测空载体、未转染及重组pMSCV转染供者淋巴细胞的P58.1分子表达率差异有显著性,重组逆转录病毒感染的供者淋巴细胞整合了受者的P58.1基因,且能转录为相应的mRNA并在细胞膜上有P58.1分子表达.结论成功获得P58.1基因并构建重组逆转录病毒载体,该基因已稳定整合入淋巴细胞的基因组中,且获得了表达.
作者：曹东林；周思朗；郭坤元；彭冬先
来源：中国现代医学杂志 2005 年 15卷 5期
