目的对结核杆菌新抗原-带信号肽的Mtb8.4(MS)进行基因克隆,构建其真核表达质粒并加以鉴定.方法采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中扩增出带信号肽的Mtb8.4(MS)目的基因,经HindⅢ和EcoRI消化后,与pcDNA3.1(+)载体进行连接重组.结果 pcDNA3.1(+)-MS真核表达质粒构建完成后,用限制性内切酶消化、PCR及DNA测序等多种方法进行鉴定,证实其构建成功.结论pcDNA3.1(+)-MS真核表达质粒的成功构建,为进一步研究该质粒的免疫保护效果,了解信号肽序列在MS蛋白表达和分泌过程中所起的作用及制备相应的结核病DNA疫苗奠定了基础.
作者：李晖；邹永胜；钟森；任红
来源：中国现代医学杂志 2005 年 15卷 14期
