目的 利用转基因方法建立表达mdr1基因的肝癌基因工程细胞,为深入肝癌多药耐药现象研究提供理想的细胞模型.方法 构建表达mdr1cDNA全长序列的真核表达载体PCI/mdr1,利用脂质体将mdr1cDNA转染入人肝癌细胞株HepG2细胞,通过阿霉素短暂诱导和G418筛选转染阳性细胞,筛选出稳定表达mdr1及P-gp蛋白的细胞株HepG2/R.结果 HepG2/R细胞与出发株HepG2细胞相比较,MTT法检测生长曲线并无明显差异,对阿霉素和丝裂霉素的耐药性分别增加了35.7倍和125倍.KT-PCR检测HepG2/R细胞的mdr1 mRNA表达明显增加,流式细胞仪检测HepG2/R细胞P-gP的表达状况明显增加.结论 成功建立表达mdr1基因的肝癌工程细胞株.
作者:李波;夏洪芬;李德华;陈永兵;苏松;张孟瑜;贺凯;冯春红;徐松波;倪建彬;罗亮;夏先明
来源:中国现代医学杂志 2009 年 19卷 14期