目的 通过腹腔输注体外培养的耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cells,tDCs),在小鼠体内建立tDCs诱导特异性免疫耐受方法.方法 采用雄性Balb/c 小鼠为供体,雌性昆明小鼠为受体.取供体小鼠骨髓细胞,分离单个核细胞.在合GM-CSF、IL-4、VIP、DXM和LPS等因子的RPMI 1640培养基中按不同的组合分为两组进行体外诱导培养:常规DC组(GM-CSF+IL-4)和tDC组(GM-CSF+VIP+DXM).实验分4组:空白对照组(不经任何处理)、骨髓细胞组(输骨髓细胞)、常规DC组(输常规培养DC)和tDC组(输tDC).腹腔输注细胞3 d后移植供体脾片,移植后20d取移植脾片病理组织学检查,移植后1个月流式细胞术检测受体脾单个核细胞CD80、CD86、CD40、CD110和CD4+CD25+的表达.结果 小鼠体内tDCs榆注实验:tDC组的移植脾片大体形态呈灰红色,与移植部位周围组织建立血液供应;病理学观察组织结构完整,未见明显变性坏死,与正常脾组织结构相似.而空白对照组、骨髓细胞组、常规DC组移植脾片大体呈灰白色、浅灰红色和灰褐色,与周围组织未建立血液供应;病理学观察组织结构受破坏,有的呈大片坏死.tDC组小鼠脾单个核细胞CD4+CD25+双表达细胞为(18.15±0.66)
作者:钟志宏;鄢俊;黄先豹;陈国安;袁利亚;刘振优
来源:中国现代医学杂志 2009 年 19卷 15期