目的 探讨血红蛋白(hemoglobin,Hb)诱导的血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对离体星形胶质细胞的损伤作用.方法 体外培养纯化获得星形胶质细胞,采用荧光标记胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定细胞；实验分为正常组、Hb组及HO-1活性抑制剂锌原卟啉(ZnPPIX)+Hb 组.Hoechst 33342及CCK-8法检测细胞损伤情况；Western blot检测HO-1、p-JNK、JNK、Bcl-2及Bax等蛋白的表达情况；RT-PCR检测HO-1的mRNA表达情况.结果 GFAP鉴定显示97％以上的细胞为星形胶质细胞；HO-1检测结果显示:40μmol/L的Hb可显著诱导HO-1 mRNA及蛋白的表达(P＜0.001)；Hoechst 33342及CCK-8检测结果显示:40μmol/L的Hb对离体星形胶质细胞具有损伤作用,而ZnPPIX可明显减轻上述损伤；Western blot检测结果显示:HO-1被诱导高表达时p-JNK及Bax蛋白的表达水平也显著升高而Bcl-2蛋白的表达水平显著下降(P＜0.01),ZnPPIX处理后与Hb组相比p-JNK及Bax蛋白表达水平有所降低而Bcl-2蛋白表达水平则有所升高(P＜0.05).结论 40μ mol/L Hb诱导的HO-1对离体星形胶质细胞具有损伤作用.
作者：陈浩；王兴启；崔桂云；赵辉；宋远见；高丽；荆佳；沈霞
来源：中国现代医学杂志 2011 年 21卷 31期
