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目的 研究siRNA-SAA干扰对高糖条件培养下的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HM-Cs)炎症反应及细胞外基质(extra-cellular matrix.ECM)的影响,探讨血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,sAA)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)发生发展中的作用.方法 传代培养的HMCs同步化后分组,脂质体Lipofectamine TM2000转染抑制SAA表达的siRNA或无关的siRNA (negative siRNA,neg-siR-NA),用荧光倒置显微镜观察转染效率,利用real-time RT-PCR技术检测SAA及肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-d)的mRNA表达,ELISA技术检测SAA、纤连蛋白(fibronectin,FN)、TNF-α蛋白的表达情况.结果 SAA-siRNA转染可抑制高糖刺激的HMCs中SAA、FN、TNF-α的表达水平(P<0.05).结论 SAA是高糖诱导HMCs分泌ECM及炎症反应的重要介质,通过RNA干扰(RNA interference,RANi)技术抑制SAA的表达,可减少高糖刺激下系膜细胞FN、TNF-α的积聚,减少肾小球的ECM和炎症反应,为进一步寻找DKD防治的靶点提供了新的实验依据.

作者:付裕;王秋月;马东蔚

来源:中国现代医学杂志 2012 年 22卷 29期

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作者:
付裕;王秋月;马东蔚
来源:
中国现代医学杂志 2012 年 22卷 29期
标签:
血清淀粉样蛋白A RNA干扰 人肾小球系膜细胞
目的 研究siRNA-SAA干扰对高糖条件培养下的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HM-Cs)炎症反应及细胞外基质(extra-cellular matrix.ECM)的影响,探讨血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,sAA)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)发生发展中的作用.方法 传代培养的HMCs同步化后分组,脂质体Lipofectamine TM2000转染抑制SAA表达的siRNA或无关的siRNA (negative siRNA,neg-siR-NA),用荧光倒置显微镜观察转染效率,利用real-time RT-PCR技术检测SAA及肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-d)的mRNA表达,ELISA技术检测SAA、纤连蛋白(fibronectin,FN)、TNF-α蛋白的表达情况.结果 SAA-siRNA转染可抑制高糖刺激的HMCs中SAA、FN、TNF-α的表达水平(P<0.05).结论 SAA是高糖诱导HMCs分泌ECM及炎症反应的重要介质,通过RNA干扰(RNA interference,RANi)技术抑制SAA的表达,可减少高糖刺激下系膜细胞FN、TNF-α的积聚,减少肾小球的ECM和炎症反应,为进一步寻找DKD防治的靶点提供了新的实验依据.