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目的 探讨内皮源性降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞抗凋亡作用.方法 培养HUVEC-12,分别加入不同剂量的AngⅡ孵育内皮细胞,研究其量效和时效关系,并给予特异性AT1受体阻断剂氯沙坦研究其可能的机制.Real time-PCR检测内皮细胞中CGRP mRNA水平;放射免疫法检测内皮细胞CGRP的含量.在培养HUVEC-12给予AngⅡ诱导细胞凋亡,外源性给予CGRP和辣椒素.Annexin V-FITC流式细胞检测细胞凋亡;比色法测定caspase-3活性;RT-PCR检测内皮细胞中CGRP、Bcl-2和Bax mRNA的表达.结果 ①AngⅡ孵育内皮细胞可剂量和时间依赖性地降低α-和β-CGRP mRNA的表达水平和CGRP含量,此作用可被预先给予的氯沙坦阻断.②CGRP可剂量依赖性降低AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,减弱AngⅡ增加内皮细胞caspase-3活性,此作用能被预先给予的CGRP受体阻断剂CGRP8-37取消.③辣椒素可剂量依赖性上调内皮源性α-和β-CGRP mRNA的表达水平,此作用能被预先给予的VR1受体阻断剂capsazepine取消.④辣椒素可剂量依赖性降低AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,减弱AngⅡ增加内皮细胞caspase-3活性,此作用能被预先给予的capsazepine和CGRP8-37取消.⑤辣椒素可以上调抗凋亡分子Bcl-2 mRNA的表达,下调促凋亡分子Bax mRNA的表达,此作用能被预先给予的capsazepine和C

作者:张毅民;彭军;李元建

来源:中国现代医学杂志 2013 年 23卷 24期

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作者:
张毅民;彭军;李元建
来源:
中国现代医学杂志 2013 年 23卷 24期
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内皮源性降钙素基因相关肽 人脐静脉内皮细胞 血管紧张素Ⅱ 凋亡 endothelial cell-derived calcitonin gene-related peptide human umbilical vein endothelial cells angiotensin Ⅱ apoptosis
目的 探讨内皮源性降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞抗凋亡作用.方法 培养HUVEC-12,分别加入不同剂量的AngⅡ孵育内皮细胞,研究其量效和时效关系,并给予特异性AT1受体阻断剂氯沙坦研究其可能的机制.Real time-PCR检测内皮细胞中CGRP mRNA水平;放射免疫法检测内皮细胞CGRP的含量.在培养HUVEC-12给予AngⅡ诱导细胞凋亡,外源性给予CGRP和辣椒素.Annexin V-FITC流式细胞检测细胞凋亡;比色法测定caspase-3活性;RT-PCR检测内皮细胞中CGRP、Bcl-2和Bax mRNA的表达.结果 ①AngⅡ孵育内皮细胞可剂量和时间依赖性地降低α-和β-CGRP mRNA的表达水平和CGRP含量,此作用可被预先给予的氯沙坦阻断.②CGRP可剂量依赖性降低AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,减弱AngⅡ增加内皮细胞caspase-3活性,此作用能被预先给予的CGRP受体阻断剂CGRP8-37取消.③辣椒素可剂量依赖性上调内皮源性α-和β-CGRP mRNA的表达水平,此作用能被预先给予的VR1受体阻断剂capsazepine取消.④辣椒素可剂量依赖性降低AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,减弱AngⅡ增加内皮细胞caspase-3活性,此作用能被预先给予的capsazepine和CGRP8-37取消.⑤辣椒素可以上调抗凋亡分子Bcl-2 mRNA的表达,下调促凋亡分子Bax mRNA的表达,此作用能被预先给予的capsazepine和C