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目的 旨在通过同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析原发性肾病综合征(PNS)患者尿液差异表达蛋白,寻找高特异性、无创性评估PNS的病理损害标记蛋白,并结合相应蛋白功能探讨其在PNS发病机制及疾病进展中的作用.方法 9例PNS患者肾穿刺当日和3例健康人的晨尿标本经毛细管高效液相色谱仪分离后,Q-Exactive质谱仪进行质谱分析,Maxquant 1.4.1.2和persus 1.4.1.3软件进行查库鉴定、定量和数据分析.结果 成功得到PNS尿液蛋白SDS-PAGE电泳图谱,并得到724个蛋白质组,其中 ≤2的唯一肽段308个,定量、查库鉴定和数据分析最终得到差异蛋白表达明显的19个.其中与3例健康对照患者差异表达的蛋白3个,包括抗胰蛋白酶(AAT)、抗胰凝乳蛋白酶(AACT)和微管蛋白酪氨酸连接酶类似物7.结论 iTRAQ技术评估PNS尿液蛋白质组变化具有现实可行性,可以用于更深入的研究.

作者:陈东辉;丘余良

来源:中国现代医学杂志 2016 年 26卷 23期

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作者:
陈东辉;丘余良
来源:
中国现代医学杂志 2016 年 26卷 23期
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原发性肾病综合征 同位素标记相对和绝对定量技术 尿液蛋白质组学 primary nephrotic syndrome isobaric tags for relative and absolute quantitation urine proteomics
目的 旨在通过同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析原发性肾病综合征(PNS)患者尿液差异表达蛋白,寻找高特异性、无创性评估PNS的病理损害标记蛋白,并结合相应蛋白功能探讨其在PNS发病机制及疾病进展中的作用.方法 9例PNS患者肾穿刺当日和3例健康人的晨尿标本经毛细管高效液相色谱仪分离后,Q-Exactive质谱仪进行质谱分析,Maxquant 1.4.1.2和persus 1.4.1.3软件进行查库鉴定、定量和数据分析.结果 成功得到PNS尿液蛋白SDS-PAGE电泳图谱,并得到724个蛋白质组,其中 ≤2的唯一肽段308个,定量、查库鉴定和数据分析最终得到差异蛋白表达明显的19个.其中与3例健康对照患者差异表达的蛋白3个,包括抗胰蛋白酶(AAT)、抗胰凝乳蛋白酶(AACT)和微管蛋白酪氨酸连接酶类似物7.结论 iTRAQ技术评估PNS尿液蛋白质组变化具有现实可行性,可以用于更深入的研究.