目的 体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A10)基因SNP rs10187694多态位点G/A变异对吗替麦考酚酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF个体代谢差异有关.方法 采用基因重组、定点突变技术,构建UGT1A10基因SNP rs10187694位点含有不同等位基因的重组过表达载体,POLO 3000转染法将重组过表达载体转染入HEK293细胞,采用液相色谱-质谱联用仪(LC/MS/MS)系统,检测霉酚酸(MPA)代谢产物7-O-葡醛酸苷(MPAG)的生成量,以评估转染不同等位基因HEK293细胞中酶的活性.结果 成功构建pIRES2-EGFP-prom(G)和pIRES2-EGFP-prom(A)重组过表达载体,并转染HEK293细胞.LC/MS/MS系统检测结果显示,携带A等位基因的突变型UGT1A10代谢MMF产生MPAG的能力降低,其24 h MPAG的生成量为(226.00±14.57)nmol/L,而野生型的生成量为(269.00±14.07)nmol/L,UGT1A10突变型MPAG的生成量是野生型的84.00
作者：肖超；孙红成；邓贵龙；宋国贺；王宇鹏；陈健；孙星；钟林；彭志海；王晓亮
来源：中国现代医学杂志 2017 年 27卷 12期
