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目的 构建可在血液系统中条件性敲除DNMT3B基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT3B基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型.方法 将引进的DNMT3Bflox/flox小鼠与Mx1-Cre+小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre-两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+的小鼠,通过腹腔注射pI-pC共5次诱导DNMT3B敲除,然后用半定量PCR方法鉴定DNMT 3B基因敲除情况.结果 基因型鉴定确认在13只子鼠中有2只为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+,经pI-pC腹腔注射后,DNMT 3B基因通过Cre/loxP系统被成功敲除.结论 该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT3B基因的小鼠,并进行敲除后鉴定.

作者:李福兴;胡超;何薇;乔晓红;谢晓恬

来源:中国现代医学杂志 2018 年 28卷 6期

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作者:
李福兴;胡超;何薇;乔晓红;谢晓恬
来源:
中国现代医学杂志 2018 年 28卷 6期
标签:
DNMT3B 基因敲除 Cre/loxp系统 小鼠 DNMT3B gene knockout cre/loxp mice
目的 构建可在血液系统中条件性敲除DNMT3B基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT3B基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型.方法 将引进的DNMT3Bflox/flox小鼠与Mx1-Cre+小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre-两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+的小鼠,通过腹腔注射pI-pC共5次诱导DNMT3B敲除,然后用半定量PCR方法鉴定DNMT 3B基因敲除情况.结果 基因型鉴定确认在13只子鼠中有2只为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+,经pI-pC腹腔注射后,DNMT 3B基因通过Cre/loxP系统被成功敲除.结论 该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT3B基因的小鼠,并进行敲除后鉴定.