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目的 探讨细胞外超氧化物歧化酶DNA(EC-DNA)甲基化水平改变在动脉粥样硬化发病中的作用.方法 16只ApoE-/-小鼠(ApoE-/-组)给予高脂饲料喂养,16只C57BL/6小鼠(WT组)给予不含任何高脂成分的普通饲料喂养,分别于喂养第8、12、16和20周检测小鼠血脂、主动脉组织形态及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测主动脉组织细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)、DNMT1 mRNA水平,巢式甲基化特异性聚合酶链反应检测主动脉组织EC-SOD DNA甲基化程度.将THP-1诱导为巨噬细胞,分为3组:空白对照组(NC组)、空白质粒组(pEGFP-N1组)和重组质粒组(pEGFP-N1-DNMT1组),NC组用不做任何处理,继续培养,pEGFP-N1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg空质粒载体pEGFP-N1,pEGFP-N1-DNMT1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg pEGFP-N1-DNMT1重组质粒载体,培养24 h后检测细胞EC-SOD、DNMT1蛋白表达和EC-SOD DNA甲基化程度.结果 第8、12、16和20周,ApoE-/-组TC、LDL、TG呈升高趋势,HDL无明显变化;各时段ApoE-/-组TC、LDL、TG、HDL与WT组比较,差异有统计学意义(P <0.05),TC、LDL、TG高于WT组,HDL低于WT组.第16和20周,WT组动脉组织内皮细胞结构规则有序,ApoE-/-组主动脉内膜明显增厚并伴炎症浸润.第8、12、16

作者:陈佳;杨晓龙;张旭峰

来源:中国现代医学杂志 2018 年 28卷 10期

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陈佳;杨晓龙;张旭峰
来源:
中国现代医学杂志 2018 年 28卷 10期
标签:
细胞外超氧化物歧化酶 DNA甲基化 DNA甲基转移酶 动脉粥样硬化 氧化应激损伤 extracellular superoxide dismutase DNA methylation DNA methyltransferase 1 atherosclerosis oxidative stress damage
目的 探讨细胞外超氧化物歧化酶DNA(EC-DNA)甲基化水平改变在动脉粥样硬化发病中的作用.方法 16只ApoE-/-小鼠(ApoE-/-组)给予高脂饲料喂养,16只C57BL/6小鼠(WT组)给予不含任何高脂成分的普通饲料喂养,分别于喂养第8、12、16和20周检测小鼠血脂、主动脉组织形态及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测主动脉组织细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)、DNMT1 mRNA水平,巢式甲基化特异性聚合酶链反应检测主动脉组织EC-SOD DNA甲基化程度.将THP-1诱导为巨噬细胞,分为3组:空白对照组(NC组)、空白质粒组(pEGFP-N1组)和重组质粒组(pEGFP-N1-DNMT1组),NC组用不做任何处理,继续培养,pEGFP-N1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg空质粒载体pEGFP-N1,pEGFP-N1-DNMT1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg pEGFP-N1-DNMT1重组质粒载体,培养24 h后检测细胞EC-SOD、DNMT1蛋白表达和EC-SOD DNA甲基化程度.结果 第8、12、16和20周,ApoE-/-组TC、LDL、TG呈升高趋势,HDL无明显变化;各时段ApoE-/-组TC、LDL、TG、HDL与WT组比较,差异有统计学意义(P <0.05),TC、LDL、TG高于WT组,HDL低于WT组.第16和20周,WT组动脉组织内皮细胞结构规则有序,ApoE-/-组主动脉内膜明显增厚并伴炎症浸润.第8、12、16