目的 探索在小鼠肿瘤细胞中对抗营养缺乏的分子途径.方法 构建ATG5基因表达的质粒并瞬时转染至细胞内;用不同靶基因的si-RNAs转染到细胞来沉默基因的表达;不同条件下提取小鼠正常肝细胞AML-12和肝癌细胞Hepa1-6的RNA和蛋白;用qRT-PCR检测基因的表达;用Western blot检测蛋白的表达;用流式细胞仪检测细胞周期;用CCK-8的试剂测定细胞活性.结果 与小鼠正常肝细胞AML-12比较,肝癌细胞Hepa1-6对缺血引发的细胞死亡有抵抗性.缺血使Hepa1-6细胞内诱导自噬相关蛋白ATG5表达升高(P<0.05);沉默内源ATG5基因后Hepa1-6细胞对缺血的敏感性升高,且ATG5诱导细胞周期抑制蛋白p21(cip1/waf1)表达增加使细胞滞留在G1期.结论 在营养缺乏的环境中,Hepa1-6细胞内ATG5表达升高,且ATG5增加p21(cip1/waf1)的表达量使细胞滞留在G1期,可能与对抗缺血引起的死亡有关.
作者：马成；马孙强；李济宇
来源：中国现代医学杂志 2018 年 28卷 15期
