目的 研究盐酸小檗碱对肝星状细胞(HSCs)自噬和凋亡的影响.方法 取指数生长期HSC-LX2细胞,实验分组:溶剂对照组(1‰ DMSO)、盐酸小檗碱5 μg/ml组、盐酸小檗碱10 μg/ml组和盐酸小檗碱20 μg/ml组.盐酸小檗碱干预24 h.流式细胞术检测细胞凋亡、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) 阳性细胞荧光强度.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Caspase-3、与Bcl-2相互作用的肌球蛋白样卷曲螺旋蛋白1(Beclin1)、自噬相关基因5(Atg5)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)mRNA的表达,Western blotting检测Beclin1、Atg5、Akt、p-Akt、JNK及p-JNK蛋白的表达.结果 与溶剂对照组比较,不同盐酸小檗碱浓度干预组HSC-LX2凋亡增加(P <0.05),Caspase-3 mRNA表达增加(P <0.05),Caspase-3阳性细胞荧光强度及蛋白活性升高(P <0.05);Beclin1、Atg5 mRNA及蛋白水平下降(P <0.05);Akt、JNK mRNA水平下降(P <0.05),Akt、p-Akt、JNK、p-JNK蛋白水平下降(P <0.05).结论 盐酸小檗碱可能通过抑制Akt信号通路促进凋亡,通过抑制JNK信号传导途径抑制自噬.
作者:张建;赵红伟;胡义亭;张大雷;高俊茶;郑吉敏;王玉珍
来源:中国现代医学杂志 2020 年 30卷 5期